紅外分光光度計由光源發出的光，被分為能量均等對稱的兩束，一束為樣品光通過樣品，另一束為參考光作為基準。這兩束光通過樣品室進入光度計后，被扇形鏡以一定的頻率所調制，形成交變信號，然后兩束光和為一束，并交替通過入射狹縫進入單色器中，經離軸拋物鏡將光束平行地投射在光柵上，色散并通過出射狹縫之后，被濾光片濾除高級次光譜，再經橢球鏡聚焦在探測器的接收面上。探測器將上述交變的信號轉換為相應的電信號，經放大器進行電壓放大后，轉入A/D轉換單位，計算機處理后得到從高波數到低波數的紅外吸收光譜圖。